產(chǎn)品描述

1 Neon®轉(zhuǎn)染系統(tǒng)是一款新一代電穿孔系統(tǒng)，可將DNA、RNA和蛋白高效轉(zhuǎn)入各種類型的細(xì)胞內(nèi)，特別是那些難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類型，如干細(xì)胞和原代細(xì)胞。

2 這款開(kāi)放、靈活的臺(tái)式設(shè)備允許您自行優(yōu)化和建立自己的實(shí)驗(yàn)流程。與使用電擊杯的傳統(tǒng)電穿孔設(shè)備不同，Neon®轉(zhuǎn)染系統(tǒng)采用獨(dú)特的移液器穿孔室，可直接在Neon®移液器吸頭內(nèi)完成DNA/RNA的細(xì)胞轉(zhuǎn)染。這種獨(dú)特的設(shè)計(jì)能夠產(chǎn)生更為均勻的電流和pH值，從而獲得更高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞活性。

3 Neon®系統(tǒng)套裝對(duì)各種細(xì)胞類型均使用同一種緩沖系統(tǒng)，可選擇兩種轉(zhuǎn)染體積：10 μL和100 μL吸頭，更為靈活，減少了珍貴細(xì)胞樣品的浪費(fèi)。

特點(diǎn)與優(yōu)點(diǎn)

1 采用性移液器穿孔室設(shè)計(jì)，使用簡(jiǎn)單、快速。

2 高效性：對(duì)90%以上類型的細(xì)胞均可獲得更高的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞活性。

3 簡(jiǎn)便性：一個(gè)通用試劑盒適用于全部細(xì)胞類型，產(chǎn)品保質(zhì)期達(dá)12個(gè)月。

4 靈活性：兩種大小的吸頭，每次反應(yīng)可轉(zhuǎn)染2x10⁴至1 x 10⁷個(gè)細(xì)胞。

5 多功能性：開(kāi)放式系統(tǒng)，通過(guò)調(diào)節(jié)電穿孔參數(shù)，在感興趣的細(xì)胞上取得結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)流程

1 準(zhǔn)備用于轉(zhuǎn)染的移液工作站。將裝有緩沖液的電解管插入移液工作站中。

2 如果使用的是貼壁細(xì)胞：用胰蛋白酶或Tryp^LE試劑將細(xì)胞重懸。

3 用PBS沖洗細(xì)胞。

4 向細(xì)胞懸液中加入DNA或RNA (或其它要轉(zhuǎn)染的物質(zhì))。

5 裝上Neon®移液器吸頭。

6 將細(xì)胞混合液吸入Neon®移液器吸頭中。

7 將Neon®移液器插入移液工作站中。

8 選擇電壓、脈沖時(shí)間和脈沖數(shù)；按“start”。

9 從工作站中取出移液器，將轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞注入培養(yǎng)板中。

技術(shù)竅門(mén)

1 培養(yǎng)細(xì)胞定期傳代和更換培養(yǎng)基可使電穿孔效率更為穩(wěn)定。

2 大多數(shù)類型的細(xì)胞在其生長(zhǎng)曲線的對(duì)數(shù)期進(jìn)行操作時(shí)能夠獲得的電穿孔效率。

3 質(zhì)粒DNA質(zhì)量對(duì)于電穿孔能否成功至關(guān)重要。借助Life Technologies的PureLink HiPure試劑盒及沉淀劑，能夠獲得內(nèi)毒素和鹽分很低的DNA，非常適合在Neon®電穿孔儀上使用。

配套耗材

Neon®轉(zhuǎn)染（1包=100只）；Neon®轉(zhuǎn)染系統(tǒng)10μL/100μL套裝;