在氣相色譜中,為了對寬沸程樣品的分離和縮短分析周期,廣泛采用程序升溫的方法。而在液相色譜中對組分復雜的樣品則采用梯度洗脫的方法。在同一個分析周期中,按程序不斷改變流動相的濃度配比,稱為梯度洗脫。從而可以使一個復雜樣品中的性質差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k良好的分離目的。
在液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什么?梯度洗脫裝置分兩種:
1.高壓梯度:用兩臺高壓輸液泵將兩種溶劑輸入
2.低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然后用高壓輸液泵將流動相輸入到色譜柱中。
梯度洗脫可分離度、縮短分離時間、降低小檢測量和分離。但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。
梯度洗脫時應注意:
1、注意各溶劑間的互溶性。
2、對溶劑的純度要求更高(影響重現性)。
3、注意梯度變化時系統壓力的變化,出限度。
4、梯度結束后,用初始流動相沖洗,使柱子平衡一段時間(再生),使系統回復到初始狀態。(梯度周期)
5、低壓梯度要注意脫氣,混合后容易產生氣泡。
6、容易出現峰,應作空白試驗。
7、梯度選擇時盡量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。
8、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇性檢測器(如紫外吸收檢測器或熒光檢測器),而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器(如示差折光檢測器)。
9、要注意水相中鹽的濃度,在相過程中鹽的析出。
文章來源:武漢恒信世紀科技有限公司
公司地址:湖北省武漢市江夏區九鳳街光谷8號工坊1-3-601









