成像表面等離子共振(Imaging_SPR)及生物分子的相互作用--應用程序包 成像表面等離子體共振單元(SPR)是德國Accurion成像橢偏儀的一個功能拓展模塊。該模塊在化學、生物等領域具有重要應用,如生物芯片、蛋白質反應、生物傳感器等。 概述采用表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance, SPR)來研究檢測生物分子相互作用是當前為先進的研究技術。該領域為新穎的發展就是基于成像橢偏的成像表面等離子共振(Imaging SPR)技術。該技術的優勢是研究者可以直接研究檢測任意感興趣微區(Regions of Interests, ROI)的SPR信息,并且能同時獲得該微區的橢偏數據從而實現生物分子相互反應實時跟蹤。該橢偏數據有物理上的意義,可用于在光學建模,并且提供更為豐富的信息。該技術基于成像橢偏技術,因此不需對微陣列上的感興趣微區(Regions of Interests, ROI)進行標記或預定義,研究者可以對多個區域同時進行研究,甚至對整個微陣列進行生物分子相互作用的成像研究。 應用實例基片特征分子和表層多價微圖案化表層上的蛋白質聚積An approach towards differential immobilization and arraying of histidine-tagged proteins by combining molecular and surface multivalency was presented. Different self-assembled monolayers were formed by tri-ethylene glycol-terminated alkyl thiols functionalized with either a single nitrilotriacetic acid (NTA) moiety (mono-NTA) or with a novel chelator head group containing two NTA moieties. Protein binding was monitored in real time by imaging SPR in the ellipsometric mode. Paper:R. Valiokas, G. Klenkar, A. Tinazli, R. Tamp, B. Liedberg, J. Piehler (2006) Differential Protein Assembly on Micropatterned Surfaces with Tailored Molecular and Surface Multivalency. ChemBioChem 7, 1325 – 1329 脂蛋白質系統的高通量分析基因芯片 – 采用基于成像橢偏的成像表面等離子共振(Imaging SPR)并行分析檢測Bo Liedberg and colleagues demonstrate a chip platform for the adres-seable immobilization of protein-loaded vesicles on a microarray for parallelized high-trough put analysis of lipid-protein systems. Imaging surface Plasmon resonance in ellipsometric mode to monitor vesicle immobilization, protein tethering, protein-protein interaction and chip regeneration. Paper:G.Klenkar, B. Brian, Th Ederth, G. Stengel, F. Höök, J. Piehler, B. Liedberg (2008) Addressable adsorption of lipid vesicles and subsequent protein interaction studies. Biointerphases 3: 29-37. 常見毒品,如可卡因、搖頭丸、海洛因和安非他明微陣列芯片的無標記檢測。A protein array chip for label-free optical detection of low molecular weight compounds has been developed. As a proof of principle, the chip is proven capable of rapidly determining hits from aqueous cocktails composed of four common narcotics, cocaine, ecstasy, heroin, and amphetamine, using imaging surface plasmon resonance in the ellipsometric mode. Paper:G. Klenkar, B. Liedberg (2008) A microarray chip for labelfree detection of narcotics. Anal Bioanal Chem 39. 硬件動力學/SPR單元(Kinetics / SPR cell)動力學/SPR單元是為在液體環境下的透明基片(如玻璃基片,OptiSlide基片和表面等離子共振SPR基片)上有機物(如蛋白質)動力學測試量身定制的。該單元腔體采用生物性相容材料,并且適用于水劑液體如鹽水,緩沖液等等。 帕爾貼溫度控制單元(Peltier temperature control device)帕爾貼溫度控制單元確保測試在恒定溫度下進行。當然也可以在快速溫度梯度下進行測試。 液體控制單元(Liquid handling)液體控制單元油由閥門裝置,蠕動泵,油管和測量室構成。 自動樣品臺(Automatic handling stage)軟件控制樣品臺在X / Y/ Z方向運動, X和Y方向的行程為90mm;Z方向行程為10mm。樣品臺自動對準0.01度,角分辨率為0.001度。 動力學附加軟件(Kinetics AddOn)動力學附加軟件為蛋白質陣列動力學測試提供完整的記錄,可視化研究和評估,是研究蛋白質陣列動力學反應過程的有效軟件工具。動力學軟件作為EP3查看軟件的聯用部分,在測量過程中輸入所有相關數據,并允許廣泛的在線和后期的分析。 耗材各種附件(Accessories)作為附件提供包括性的注射器,單向套管,清洗管路和組織的噴霧瓶。快速掌握動力學測量的實驗說明手冊。 基片(Substrates)動力學測量通常使用的基片有:玻片,OptiSlides基片和表面等離子共振(SPR)基片。 菱鏡(Prism)為不同的基片配置三種不同的菱鏡:- SF10, 60° 配Nanofilm_SPR-slides- BK7, 60° 配Nanofilm_OptiSlides- BK7, 45° 配常用玻片